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この記事の内容：細菌を直接観察するバイオマスを測定する比濁法による手順8参考文献
細菌の増殖を測定する方法はいくつかあり、他の方法よりも実装が難しい方法もあります。最も単純なものが一般的に使用され、測定中に厳密であれば、比較的正確な結果が得られます。最も一般的な手法は、細菌の観察とカウント、バイオマスと乾燥バイオマスの測定、および比濁法です。学校のラボには、これらの方法の少なくとも1つに必要な機器が必要です。
ステージ
方法1細菌を直接観察する
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機器を準備します。 すべての生物学ラボで通常見られるものに加えて、いくつかの特定のアイテムが必要になります。すべての器具と容器を指先に置いておくと、機器が保管されているクローゼット内を行き来する必要がなくなります。各段階で何を使用するかを知るために、何をするかを先に考えてください。また、いくつかの重要な用語を知っておく必要があります。- 血球計を入手してください。それは、顕微鏡に関連付けられている数のチャンバーを持つブレードです。調整と使用が非常に簡単な楽器です。学校や研究室向けの機器に特化したサプライヤからいくつかを見つけることができます。通常、ユーザーマニュアルが提供されます。
- ペトリ皿を取ります。これは、細菌を観察できる、小さくて丸い、浅い容器です。
- 「培養」という用語は、科学実験の一部として人工的に増殖される微生物を指します。
- 「文化のスープ」は、文化が発達する媒体です。
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ペトリ皿を使用します。 バクテリアを箱に入れて、顕微鏡で観察します。スライドに直接置くこともできます。次に、存在する細菌細胞の数を数えます。 -
正しい濃度であることを確認してください。 バクテリアが多すぎると、バクテリアが重なり合って、正しくカウントできなくなります。この場合、培養液を少量のブロスと混ぜて希釈します。少なすぎる場合、結果は重要ではありません。その後、濃度を上げるためにブロスをろ過する必要があります。 -
細菌を数えます。 最後のステップは、単に数えることです。顕微鏡の下でカウントチャンバーを見て、あなたが見る細胞の数に注意してください。結果を他の同様の経験と比較します。
方法2バイオマスの測定
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必要な機器があることを確認してください。 この方法は実装が遅く、高価な機器を使用する必要があります。洗わない場合は、別のテクニックを使用してください。一方、現在の研究室に適切なツールがあれば、バイオマスと乾燥質量の測定は正確な結果が得られるため理想的です。必要なもの：- 強制対流油圧オーブン、
- アルミ製計量皿、
- いくつかの三角フラスコ、
- 遠心分離機または実験室のろ過システム。
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作物が三角フラスコにあることを確認します。 そうでない場合は、注いでください。実験のこの段階では、細菌はまだ培養液に含まれています。それらは後で分離されます。 -
計量皿を乾かします。 このために、オーブンに入れてください。孔径0.45μmの直径47 mmの酢酸セルロース膜フィルターを使用することもできます。どちらのツールを使用する場合でも、作物を置いたときに得られる結果から減算できるように、その質量を正確に測定します。 -
ミックス。 培養が均一になるように、lerlenmeyerを攪拌します。実際、重力のために、細胞は自然に容器の底に落ちる傾向があります。そのため、均一に分布し、サンプルがより代表的であるものを少し振る必要があります。 -
遠心分離。 遠心分離機を使用して、培養液から細菌を分離します。このデバイスは、コンテナとカウンターウェイトを非常に高速で回転させるために使用されます。ブイヨンが流れ、生物のみが保持されます。詳細については、インターネットで遠心分離機を使用する方法に関する情報を検索できます。 -
生地を取得します。 計量皿に落とします。培養液は捨てることができますが、もう必要ありませんが、lerlenmeyerは手元に置いておきます。 -
遠心機をすすぐ。 細菌細胞に加えてすすぎ水を計量皿に注ぐ。すべてについて得られた結果はバイオマスを与えます。 -
乾燥質量を見つけます。 サンプルの乾燥バイオマスを知るには、デバイスに付属の説明書に従って、6〜24時間、100°Cに設定したオーブンに計量皿を置きます。細菌の燃焼を避けるため、この温度を超えないように注意してください。次に、すべてを計量し、トレイの質量を引きます。
方法3比濁法による測定
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機器を準備します。 ほとんどの科学研究室で見られるデバイスである光源と分光光度計が必要です。各モデルには独自の操作があるため、付属のユーザーマニュアルを参照してください。この方法は、安価で使いやすいツールのみを必要とするため、細菌の増殖を測定するために最も頻繁に使用される方法の1つです。 -
文化に光をもたらします。 濁度は、粒子中の液体の含有量を評価するために使用され、濁りの程度を決定することになります。この測定から得られる結果は、NTU（または比濁濁度単位）で示されます。サンプルの濁度を正確に測定するために、デバイスのキャリブレーションを実行する必要がある場合があります。 -
メモを取る。 濁度は、サンプル中の細菌の量です。また、分光光度計を使用すると、溶液の透過率（％T）を知ることができ、その値は濁度の透過率に反比例します。次に、異なるサンプルで得られた結果を比較して、細菌の増殖を測定します。